期刊简介
《中国现代药物应用》是中华人民共和国国际卫生和计划生育委员会、中国水利电力医学科学技术学会编辑出版的学术期刊，旬刊，设有论著、短篇论著、专家论坛、专题报道、综述、临床医学、药物与临床、实验与基础研究等多个栏目，读者对象为从事临床和医学基础研究的医务工作者。
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首页>中国现代药物应用杂志
- 杂志名称：中国现代药物应用杂志
- 主管单位：国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会
- 国际刊号：1673-9523
- 国内刊号：11-5581/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：期刊收录：维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
HIV-1gp120真核表达载体的构建及表达
陈文江
关键词：Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1), gp120, 三聚体, 真核细胞, 表达
摘要：目的 模拟HIV-1包膜糖蛋白天然构象,在真核细胞中高效表达三聚体包膜糖蛋白.方法 本研究以原代HIV-1分离株06044包膜为研究对象,将不含信号肽序列的包膜gp120基因克隆至含有人类组织型纤溶酶原激活物(tPA)的信号肽序列的真核表达载体上,构建单体形式gp120蛋白表达载体;或将其克隆至含有tPA信号肽序列和蛋白质三聚化模序MTQ的真核细胞表达载体上,构建三聚体形式gp120蛋白表达载体.gp120重组表达载体体外瞬时转染293T细胞,western blot检测表达情况.结果 获得gp120蛋白单体和三聚体的真核细胞表达载体pcT.06044 gp120 m/co和pcT.06044 gp120T/co;重组质粒瞬时转染293T细胞后western blot分析,在变性条件下,两组细胞培养上清均检测到单体形式gp120蛋白;非还原条件下,pcT.06044 gp120T/co转染组的细胞培养上清中检测到三聚体、二聚体和单体三种形式gp120蛋白,其百分比分别为76%、14%和10%.结论 本研究成功构建了HIV-1原代06044株包膜gp120单体和三聚体表达载体,并在哺乳细胞中成功表达了gp120单体和三聚体蛋白.
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